PCR实验室如何消毒?

PCR实验即临床基因扩增实验，是专门用来检验病Du感染性疾病的一种检测手段。它通过将病Du体内所含的基因进行扩增的方法，测出一些含量不高的感染者体内是否含有特定的病Du。 

就现如今核酸检测来说，RT-PCR是目前广泛使用较准确的筛选和确认方法，大规模核酸检测，必然会引起相关机构单位着力建设规范的临床PCR实验室。

建立PCR实验室的要求：

1、建设要求：PCR实验室的建设需要设置标准的“四区”：试剂准备区、标本制备区、PCR扩增检测区和扩增产物检测区。每个独立实验区设置缓冲区，各区通过气压调节，使整个PCR实验过程中试剂和标本免受气溶胶的污染，并降低扩增产物对人员和环境的污染。

2、人员要求：进入PCR实验室，需要经过从基础理论、实验原理、规范操作、质量保证到注意事项等规范的培训，并获取PCR上岗证。

3、防护要求：须按照生物an全三级实验室的个人防护要求进行。

PCR实验的污染来源有哪些？

1、样本间交叉污染：收集样本的容器被污染或样本密封不严导致外溢，不同样本移液时忘记更换枪尖或未使用带滤芯枪尖，移液器等实验器具及耗材未及时消Du，不同样本同时开盖或样本剧烈震荡、反复吹吸导致气溶胶形成扩散，相互交叉污染。

2、实验试剂污染：主要是在 PCR 组分试剂加样过程中，由于移液器、容器、阴性对照及其它试剂被核酸模板或阳性对照污染。

3、扩增产物污染：大量拷贝的产物泄漏或扩增后的PCR反应管意外开盖，这是PCR反应中主要常见的污染问题。

4、克隆质粒污染：作为阳性质控品的克隆质粒外溢。

《临床基因扩增实验室工作规范》中有对物表清洁、消Du的要求，不同的实验区域应当有其各自的清洁用具以防止交叉污染。

1、基本原则：由清洁区向污染区进行，洁具不可交叉。

2、清洁方向：准备区→标本制备区→扩增区→产物检测区。

3、清洁范围：工作区域的物体表面(含桌、椅)，可使用含氯消Du剂擦拭，空气和工作台面可使用紫外线照射，也可使用空间消Du器进行全环节消Du。

4、PCR室内的消Du应防止扬尘（减少人员走动）、消灭DNA或RNA的基因片段。可选择悬挂紫外线灯管进行空气消Du，试验前照射30-60分钟，实验结束照射30-60分钟，必要时可照射一夜。

5、终末消Du：当出现实验室污染时，应按要求立即撤出相关人员，在无人的情况下可使用化学消Du剂进行终末消Du。

如何做到日常清洁消Du？

▲每日工作前后，对工作区域表面、地面进行清洁并消Du，使用含氯消Du液擦拭。清洁采用湿式、不扬尘的方式进行。

▲物品防尘存放。墙面定期清洁，有可见污染及时进行清洁消Du。

▲配备移动紫外线消Du装置进行空气和物表的消Du。

▲生物an全柜：实验结束时，包括仪器设备在内的生物an全柜里的所有物品都进行物体表面清洁，并移出an全柜，在每次使用前后，要清除生物an全柜内表面的污染，工作台面和内壁用1000mg/L消Du剂擦拭，作用10-15分钟后，用无菌水再次擦拭，或直接用百分之75酒精擦拭。

目前实验室开展核酸检测，仅靠人力进行物体表面和环境的消Du耗费了大量的人力和时间，因此空气与物体表面联合，可采用过氧化氢消Du系统。过氧化氢蒸汽对微生物实验室工作台面、墙面等物体表面及空气消Du效果较好，可以作为微生物实验室的综合终末消Du方法使用。